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【实验资料】Y型迷宫

31 人阅读发布时间:2024-01-12 10:19

Y型迷宫实验
简介:
       Y-迷宫由法国科学家Dellu F 1992发明的,被广泛应用于检测啮齿类动物与海马和前额叶脑区相关的辨别性学习、工作记忆和参考记忆的测试。


Y迷宫主要包括交替行为和电刺激
1、交替行为主要是利用实验动物对新异环境探索的天性,由于动物在寻找过程中,需要记住前一次探索过的方向,以免重复进入,因此Y型迷宫实验能够有效地测定动物的空间工作能力
2、电刺激测试更多的应用于检测实验动物空间辨别的学习记忆能力。
       
       Y迷宫组件比较简单、价格又相对实惠,操作也方便,因而得到了广泛应用。
       主要应用于动物的辨别性学习、工作记忆和参考记忆的测试,工作记忆主要指短期记忆,而参考记忆主要指长期记忆。Y迷宫实验相关的应用涉及了阿尔茨海默病、亨廷顿病、焦虑、抑郁症、智力障碍、精神疾病等领域。


实验装置:

       Y迷宫,有三个等长的臂,各臂夹角为120度,还有一个中间区域。每一臂尺寸为30cm8cm15cm(小鼠)和50cm×18cm×35cm(大鼠),在中央处每个臂都有一个可移动的隔板。每个Y迷宫的三个臂被随机设为:新异臂、起始臂和其他臂。

1、新异臂:在实验的第一阶段需要用隔板挡住,在第二阶段打开;

2、起始臂:就是小鼠进入迷宫所在的那个臂,

3、其他臂:就是剩下的那个臂。

整个实验过程中,只在第一阶段挡住新异臂,而其他两臂一直保持开启状态。迷宫上方1.5m处安置摄像头,全过程录像。

 
实验方法:

1、自发性交替反应
      动物放在任何一个臂的末端,任其在其中自由探索8 min,记录动物进入各个臂的总次数(动物四只脚均进入一个臂认为进臂一次),交替一次为依次进入迷宫的三个臂,123,132都可以,最大轮流次数为总进臂次数-2,交替百分比=总轮流次数/最大轮流次数×100%,动物活动的总路程和总进臂数也需要记录。

 

2、新环境和空间识别
主要包含两个阶段:
      第一个阶段即训练期或者获得期,用挡板挡住新异臂,让动物从起始臂进入,在两个臂自由探索5min,训练结束后,将动物放回笼内,并用75%的酒精消除动物气味。
1小时后进行第二阶段,打开新异臂的挡板,使所有的臂保持开放状态,动物在三个臂自由活动5min,记录在各个臂探索的时间和路程。
由于啮齿类动物有新事物探索的本能,所以记忆受损时在新臂中探索的次数、时间和路程会缩短,也要记录在各个臂进臂的次数、在各个臂探索的时间和路程。
三个臂是随机安排的,可以不同的动物选择不同的起始臂、新异臂和其他臂,但同一只小鼠,在实验的两个阶段,三个臂一定是固定的。
啮齿类动物对于该迷宫的记忆不过几个小时,按道理可以在一只动物上反复检测,但是两次实验至少隔一周,并且需要配合改变三个臂的搭配,但是最好不要这样做,因为并不能排除动物会有记忆。


3、主动回避    
      Y迷宫底部可以铺通电刺激的铜棒。迷宫的三个臂随机分为起步臂,电击臂和安全臂,三臂相交处为隔离区。电击臂为通电的一个臂(包括这个臂的隔离区),安全臂不通电。在每个臂顶端各装有15W 的信号灯,灯亮表示此臂为安全臂,此臂不通电,另两臂则通电(电压强度需要调节,每只动物电击的水平不同,直到在第一次和第二次电击时小鼠迅速抬起1-2个爪子从而使小鼠产生逃避行为的强度,一般为40-70V)。随即变换安全区,电击小鼠,以小鼠立即逃往安全臂为一次正确反应。实验前先将动物放入迷宫,让其适应5 min,正式检测时电击在灯亮后延迟为5s,动物如果能够在5秒内进入安全臂则不会受到电击。主要的方法有两种,① 随机休息法:安全臂以无规则次序变换,以训练动物辨别灯光刺激及安全臂的能力,动物受电击后逃到安全区后,灯光继续作用10-15s,熄灯后结束一次测试,动物所在臂就作为下一次测试的起点,两次测试时间间隔为1 min,1 min后再进行第2次测试,依次重复,直到达标,如果没找到,每7s进行一次电击。② 随机不休息法:安全臂同样随机变换。开始通电后,动物在电击下逃窜至灯光区后再保持30s为一次测试。然后以动物所在臂为下次测试的起始位置进行下一次测试。


达标标准:
       连续10 次电击中正确反应达9次或以上定为学会,或者连续成功率达到90%。全组动物达标标准为全组正确率(学会动物数/该组动物总数*100%)达85% 以上。
动物在训练过程中在这两种情况下都要电击:
1)没有在5秒内离开启始臂。
2)动物虽然里离开了启始臂,但是没有进入安全臂而是进入另外一个臂。
记录小鼠学会所需的训练次数,训练次数越少,说明学习能力越强。24h后进行记忆保持能力的检测,以正确反应次数占总检测次数的百分比表示记忆保持能力(正确反应的次数/总检测次数×100%),此值越高说明记忆力越好。


注意事项:
1、如在目标区放置食物,则动物需于实验前禁食,使其体重减至原体重的85 %,这样动物才具有摄取食物的动机。
2、每次训练结束后,要用酒精对迷宫进行擦拭,以免留下味道,对下一只动物产生影响,实验结束后要对实验箱进行清洗,以消除动物留下的气味。
3、每天训练次数以10-15次为宜。
4、保持安静的环境,光线较暗为适。一般在固定时间进行,排除噪音、时间等外界干扰。
5、尽量由专人负责进行,而减少判断上的人为误差。
6、如果要通过此实验来造记忆障碍的模型,那么筛选一定要严格,如果混进了本身有学习记忆障碍的动物,则会造成实验的假阳性或假阴性。

资料格式:

Y型迷宫.docx

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