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【实验资料】新物体识别实验

68 人阅读发布时间:2024-01-15 11:44

动物行为学检测---新物体识别
简介:
      物体识别实验(ORT)是一种广泛采用的行为测定方法,用于深入研究小鼠学习和记忆的各个方面。ORT的流程相当简单,可在三天内完成,包括适应日、训练日和测试日。在训练阶段,小鼠被允许探索两个相同的物体,而在测试日,其中一个物体被替换为一个全新的物体。由于老鼠天生对新奇事物的偏好,它们在识别出熟悉物体时会将大部分时间投入到新奇物体的探索中。由于这种天生的偏好,不需要采用积极或消极的强化方式,也无需进行长时间的训练计划。
      此外,ORT的灵活性使其能够根据不同的研究需求进行调整。可以通过缩短保留间隔时间来评估短期记忆,或通过延长保留间隔时间来研究长期记忆。研究人员还可以在训练前、训练后或回忆前的不同时间点使用药物干预,以探索学习的不同阶段,包括获取、早期巩固或回忆。总体而言,ORT是一种相对轻松、高效的小鼠记忆测试方法,可用于检测在药理学、生物学或遗传学操作后引起的神经心理变化。
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 原理:
     新物体识别实验是利用啮齿类动物喜欢接近和探索新奇物体的天性,来检测其学习、记忆能力的一种行为学实验。由于该实验不需要进行学习训练,也无需禁食禁水,以及不需进行惩罚或奖赏刺激,动物收到的应激影响较小,与人类再认记忆检测相似等优点而被广泛运用。

实验准备:
如何选择合适的物体?
1、为了促使动物进行识别,选择具有相似的复杂度(如纹理、形状、颜色模式和亮度等)但不同的物体。这样的选择旨在很大程度上减少可能影响实验结果的潜在偏好。
2、采用接近或稍大于老鼠大小的物体来激发探索行为。为了减少激发的偏好,确保老鼠能够在两个物体上探索,或者确保两个物体都不能攀爬。尽管攀爬物体可能增加老鼠对探索的兴趣,但只是坐在物体上的时间不计入探索时间。
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3、每个物体至少有两个相同的,为了在测试过程中很大程度地减少潜在的气味线索,最好是每个物体都有三个:一个用于训练,一个用于测试,一个用于更换去除气味。
4、选择使用不易碎裂的材料制成的物体,以防止在实验中由于物体的损坏而影响测试的连贯性,并可能对动物造成伤害。
5、在使用前和使用之间彻底清洁物体,以确保实验的准确性和可靠性。

实验光线
为了降低动物在实验中受到强烈光照的压力,请采用漫反射和低照明条件,确保迷宫中心的照明度约为20勒克斯。在设置温度和湿度时,保持类似于一般住房条件的环境。若需要将老鼠从一个房间转移到另一个房间进行实验,请在每天实验开始前至少让老鼠适应新房间1小时。这样的过渡时间有助于减轻老鼠对新环境的应激反应。

预处理
在进行训练之前需对老鼠进行处理。由于该实验依赖于啮齿动物天生对新奇事物的探索倾向,因此在处理过程中尽量减少可能对其在探索竞技场和随后探索物体时产生影响的压力或焦虑。最理想的情况是每天对老鼠进行处理1-2次,每次至少1分钟,持续1-2周,以确保在实验开始时它们对探索环境和物体的欲望保持自然。
 

实验步骤:
1、在训练日,在对角线上放置 2 个相同的物体(即一个在 NW 角,一个在 SE 角)。如果物体太轻并且可以被老鼠移动,需要将它们固定在地板上。
2、在测试日,使用每个物体的第三个副本,将一个熟悉的物体和一个新奇的物体放置在与训练日相同的对角线上。

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Tip:对于实验测试箱,使用由白色或黑色无孔塑料制成的方形室(约40 cm x 40 cm x 40 cm),与小鼠的颜色形成对比。或者,使用圆形开放场平衡每组物体的使用,这样每一个物体都可以作为一个熟悉的物体和一个新奇的物体使用。此外,平衡新物体的位置到竞技场的4个角落。确保记录哪只对角线用于哪只动物,以便训练日使用的对角线与测试日每只小鼠使用的对角线相同。
3、将相机直接放在设备的上方,以获得最佳的探索视野。可使用具有鼻点检测功能的软件进行准确分析。如果使用软件,请在开始之前捕获已放置对象的背景图像。在软件中,将探索区域设置为对象周围大约 2-3 cm。
4、在实验过程中,请确保实验者距离实验箱1米以上,并且老鼠不可见。注意:任何时候老鼠坐在物体上而没有主动的触须扫描或嗅探都不算作探索时间。


数据分析:
1、在训练(T1)和测试(T2)阶段,记录每个会话中对两个物体的总探索时间(e1和e2)。对于大多数小鼠,预期在5分钟内达到对两个物体的最小探测总数为20秒。
2、对于那些探索性行为较低且未达到最低标准的小鼠品系,可将T1和T2的时间延长至10分钟,增加5分钟,根据试点测试的观察结果调整。
3、行为评分应该在5分钟或更长时间内,一直到达到20秒的最低标准为止。
4、若小鼠在10分钟内未能在T1或T2中对两个物体的探索达到最低标准的20秒,应将其排除在分析之外。这是因为无法确认它们是否花费了足够的探索时间来进行学习或辨别。


 

资料格式:

新物体识别实验.docx

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