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实验干货 | 小鼠洞板实验大揭秘
人阅读 发布时间:2024-03-06 10:49
一、实验简介
洞板实验(Hole Board Test),主要用于研究小鼠在面临新异环境时的行为,如头深入孔洞,来反映其自发活动程度。该实验可用于新药筛选、一般药理学、神经系统研究以及中枢兴奋性、抑制性方面的研究。设计基于大鼠探洞的天性,反映其对新环境的探索能力,通过新奇和恐惧两个因素控制动物行为,用逃避反映这两因素的作用结果。
二、实验原理
洞板试验利用动物对新奇环境的探索行为,通过动物钻头的频率和时间来评估其对新环境的适应性及其认知能力。药物对钻头次数和时间的影响可表现为其抗焦虑或致焦虑的作用。此外,通过探究动物在重复实验中对环境的学习和记忆能力,可以评估其学习记忆能力。
三、实验方法
实验设定包括一个具有双层结构的箱体,其中外层用于隔音,而内层设有一个方形中空塑料柱,旨在部分限制动物的活动范围。内部装配了22根水平放置的光电管,与之对应的是红外线光源。光电管被分为两组,一组位于距离底板40mm的位置,用以监测动物的总活动量和前进动作;另一组放置于距底板125cm的高度,专门记录动物的直立探索行为。此外,箱体的四个角落各安装一根光电管,用于捕捉动物在角落的活动。
实验中,光电管还负责记录位于底板下方0.5cm位置的大鼠探洞次数和持续时间。实验周期为30分钟,期间将动物置入洞板装置并开始同步记录数据,每两分钟读取一次数据,以此绘制探洞次数与时间的关系图。实验结果显示,随着时间的推移,动物的探洞频率呈下降趋势,表明动物对实验环境的适应及其学习和记忆能力的体现。
动物的三种典型行为包括低头、直立和移动。低头行为定义为动物头部伸入洞中直至耳朵与地面平齐,或在现代装置中打断红外线光束时发生。移动则指动物使用四肢在不同区域间转移。若动物进入中心区域,需进行特别记录,因为这代表着对动物而言最大的威胁。这些探索性行为的频繁发生通常意味着较低的焦虑水平。相反,若动物未展现出这些行为,则可能表现出更高的焦虑水平。实验方案可根据观察到的行为进行调整,例如,通过将动物单独放入装置中五分钟来测试焦虑水平,然后取出,并观察注射了抗焦虑剂的动物的行为变化。随着抗焦虑剂剂量的增加,观察到镇静效果的提升。为了评估习惯化和学习行为,可能需要多次测试。随着测试的进行,由于动物对环境的适应,低头次数会减少。在测试区域内放置物体可以促进探索行为,与无物体区域的动物相比,有物体的区域中的动物显示出更强的运动活动。
孔板测试还用于评估小鼠的长期空间记忆,无需施加水或食物限制、痛苦刺激或其他不快条件。方形竞技场地板上设有四个孔,小鼠被释放进场后会自发地探索这些孔,通过短暂地用鼻子探入孔中来进行。如果24小时后再次暴露于孔板,对孔的新奇感将降低,表现为长期记忆良好的动物减少用鼻子探孔的频率。首日探孔次数作为探索指标,第二天探孔次数的减少百分比反映长期空间记忆能力。在此测试中,还需评估运动活动,以确保测试
四、实例
使用洞板测试评估小鼠的长期空间记忆,通过动物探洞的行为定义(如戳鼻子或低头),以及动物在不同条件下(如有无抗焦虑药物处理)的行为表现。实验结果可用于评估动物的学习记忆能力,认知能力以及药物的影响。
注意事项
在进行洞板实验时,需要注意实验环境的控制,如隔音和光源控制,以及实验过程中动物行为的准确记录和分析。还需考虑药物对动物运动活性的影响,确保药物剂量不影响动物的基本活动能力。同时,重复实验时要考虑动物对实验环境的适应性和记忆,这可能影响实验结果。
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